醫(yī)學(xué)免疫學(xué)實驗

第 1章　抗體制備技術(shù) 1
實驗一　多克隆抗體的制備 .1
一、抗體制備的流程 .1
二、兔抗人全血清的多克隆抗體制備 .3
三、兔抗羊紅細(xì)胞的多克隆抗體制備 .5
實驗二　單克隆抗體的制備 .6
實驗三　抗體的純化與保存 .11
一、特異性抗體的純化 .11
二、 IgG的純化 .11
三、 IgM的純化 .15
四、 SDS-PAGE法檢測免疫球蛋白純度 .16
五、抗體的保存 .17
第 2章　抗原抗體反應(yīng) 18
實驗四　凝集反應(yīng) .18
一、 ABO血型的鑒定（玻片法） .18
二、 SPA協(xié)同凝集試驗——顆粒性抗原的檢測 .20
三、間接凝集抑制試驗——妊娠檢驗 .22
四、間接血凝試驗 .22
五、反向間接血凝試驗 .24
實驗五　免疫沉淀反應(yīng) .25
一、雙向免疫擴(kuò)散 .25
二、單向免疫擴(kuò)散 .26
三、環(huán)狀沉淀試驗——血跡鑒定 28
四、瓊脂凝膠對流免疫電泳 29
五、火箭免疫電泳試驗 .30
六、免疫濁度測定 .32
實驗六　補(bǔ)體結(jié)合試驗 .33
實驗七　免疫印跡技術(shù) .35


VI　醫(yī)學(xué)免疫學(xué)實驗
第 3章　免疫標(biāo)記技術(shù) 39
實驗八　酶免疫技術(shù) 39
一、酶聯(lián)免疫吸附試驗 .39
二、酶免疫組織化學(xué)技術(shù) 42
實驗九　熒光免疫技術(shù) .43
一、直接免疫熒光法——檢測 B細(xì)胞膜表面免疫球蛋白 .43
二、間接免疫熒光法——檢測痢疾桿菌 .44
實驗十　生物素 -親和素技術(shù) .46
第 4章　免疫細(xì)胞檢測技術(shù) 48
實驗十一　人外周血單個核細(xì)胞分離及觀察 .48
實驗十二　 T細(xì)胞功能檢測 49
一、 T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗 49
二、 E花環(huán)形成試驗 51
三、流式細(xì)胞術(shù)檢測法 .52
四、 CTL介導(dǎo)的細(xì)胞毒試驗 .53
實驗十三　 B細(xì)胞功能檢測——溶血空斑試驗 55
實驗十四　固有免疫細(xì)胞功能檢測 .56
一、炎癥模型建立及細(xì)胞吞噬現(xiàn)象觀察 .56
二、 NK細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒試驗 .58
第 5章　細(xì)胞因子及其受體的檢測 60
實驗十五　白細(xì)胞介素 -1的檢測 60
實驗十六　白細(xì)胞介素 -2的檢測 62
實驗十七　白細(xì)胞介素 -2受體的檢測 63
一、可溶性白細(xì)胞介素 -2受體的檢測 .64
二、膜結(jié)合型白細(xì)胞介素 -2受體陽性細(xì)胞檢測 65
實驗十八　腫瘤壞死因子的檢測 .66
一、腫瘤壞死因子的含量檢測 66
二、腫瘤壞死因子的活性檢測 67
第 6章　 HLA分型技術(shù) . 69
實驗十九　補(bǔ)體介導(dǎo)的細(xì)胞毒試驗 .70
實驗二十　混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng) .71
實驗二十一　 PCR-SSP檢測 HLA-B27 .72
實驗二十二　 HLA基因分型——限制性片段長度多態(tài)性法 73
第 7章　免疫 PCR技術(shù) 76
實驗二十三　免疫 PCR法檢測人腫瘤壞死因子 76


第 8章　超敏反應(yīng)的檢測 79
實驗二十四　豚鼠過敏試驗 .79
實驗二十五　青霉素過敏試驗 .80
實驗二十六　血清 IgE測定 .81
一、血清總 IgE測定 .82
二、特異性 IgE測定 .83
實驗二十七　自身抗體檢測 .83
一、抗核抗體檢測 .84
二、抗胰島素抗體檢測 .85
實驗二十八　循環(huán)免疫復(fù)合物檢測 .86
一、 PEG沉淀法檢測循環(huán)免疫復(fù)合物 86
二、含甲狀腺球蛋白免疫復(fù)合物的測定 .87
實驗二十九　類風(fēng)濕因子的檢測 .88
一、膠乳凝集試驗測定類風(fēng)濕因子 88
二、 ELISA法測定類風(fēng)濕因子 89
實驗三十　結(jié)核菌素試驗 .90
實驗三十一　植物血凝素皮膚試驗 .91
附錄 93
附錄 Ⅰ　試劑的濃度 .93
附錄 Ⅱ　常用免疫學(xué)檢驗正常值 .94
附錄 Ⅲ　常用實驗動物技術(shù) .96
附錄 Ⅳ　免疫學(xué)實驗常用儀器 .99
附錄 Ⅴ　免疫學(xué)常用試劑的配制 .103
附錄 Ⅵ　實驗室規(guī)則 .106
附錄Ⅶ　醫(yī)學(xué)免疫學(xué)實驗報告冊 .107

參考文獻(xiàn) …122